摘要:
目的 研究葡萄籽提取物(GSPE)與柳氮磺吡啶(SASP)聯(lián)合用藥治療葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導的小鼠潰瘍性結腸炎的效果及作用機制。方法 將SPF級C57小鼠隨機分為對照組、模型組、GSPE (250 mg/kg)組、SASP (250 mg/kg)組、聯(lián)合用藥(SASP 250 mg/kg+SASP 250 mg/kg)組,對照組給予正常飲用水,其他組均自由飲用3% DSS水溶液,連續(xù)飲用7 d,誘發(fā)小鼠潰瘍性結腸炎模型;造模第1天同步開始ig給藥,每天記錄小鼠體質量、便血、便型等癥狀變化;7 d后斷頭取血,收集結腸和脾臟,記錄結腸長度、脾臟質量變化情況。HE染色評估小鼠結腸黏膜組織病理變化,ELISA法檢測血清和結腸組織中炎癥因子腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細胞介素(IL)-1β、IL-6和NO的表達變化以及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)細胞因子的含量變化,免疫組化分析結腸組織上皮細胞中NF-κB-p65、Nrf2、HO-1和Keap-1含量的變化。應用金氏Q值法分析聯(lián)合用藥的作用效果。結果 與模型組比較,各給藥組的小鼠體質量下降幅度顯著降低(P<0.01),小鼠腹瀉、便血癥狀改善明顯,其中聯(lián)合用藥組小鼠體質量較單獨給藥組下降更緩,小鼠腹瀉、便血程度改善更明顯(P<0.05)。各給藥組小鼠血清及結腸組織中IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、MDA含量較模型組顯著降低,SOD含量則顯著升高(P<0.01);病理組織切片分析發(fā)現(xiàn),各給藥組小鼠結腸黏膜病理損傷較模型組顯著減輕,其中聯(lián)合用藥組小鼠結腸黏膜病理損傷較單獨給藥組降低更為顯著(P<0.05)。免疫組化分析結果也顯示,各給藥組小鼠的NF-κB-p65、Keap-1蛋白表達與模型組比較顯著下調(P<0.01),Nrf2、HO-1蛋白表達顯著上調(P<0.01)。聯(lián)合給藥組與單獨給藥組比較,NF-κB-p65、Keap-1蛋白表達顯著降低(P<0.05),Nrf2、HO-1蛋白表達顯著升高(P<0.05)。金氏Q值法評價兩藥合用后對IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、MDA、NF-κB-p65、Keap-1的作用效果均大于1.15,說明GSPE與SASP具有協(xié)同作用。結論 GSPE與SASP聯(lián)合用藥治療實驗性潰瘍性結腸炎效果優(yōu)于單獨給藥,聯(lián)合用藥增強GSPE和SASP的抗氧化和抗炎作用,GSPE與SASP配伍治療潰瘍性結腸炎可進一步發(fā)揮協(xié)同增效的作用。